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對比文件1^[1]公開了：從人臍帶（hUC）中分離MSCs：WJ-MSCs、PV-MSCs和CL-MSCs，PV-MSCs、WJ-MSCs和CL-MSCs分別表達(dá)CD146、Oct4和CD14。在缺氧環(huán)境和OGD細(xì)胞培養(yǎng)條件下，PV-MSCs的線粒體活性最高，表明其在缺血環(huán)境中的存活能力較強。

對比文件2^[2]公開了：顱骨源性間充質(zhì)干細(xì)胞(cMSCs)移植與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bMSCs)移植對缺血性腦卒中大鼠模型的治療作用比較，發(fā)現(xiàn)cMSCs移植可促進(jìn)缺血性腦卒中模型大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)且效果優(yōu)于bMSCs移植，因此，顱骨可能是用于治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的理想MSCs來源。

審查意見總結(jié)

對比文件1所公開的PV-MSCs是一種CD146陽性的間充質(zhì)干細(xì)胞，且在正常和缺氧條件下具有相當(dāng)?shù)拇x能力和良好的存活率，具有作為線粒體干細(xì)胞治療中風(fēng)和其他缺血性疾病的可移植細(xì)胞的潛力。

本申請權(quán)利要求1與對比文件1的區(qū)別在于：將CD146+間充質(zhì)干細(xì)胞用于制備預(yù)防和/或治療腦卒中的藥物。

實際解決的技術(shù)問題：如何擴展CD146+間充質(zhì)干細(xì)胞的應(yīng)用。

對比文件2則給出了間充質(zhì)干細(xì)胞可以治療腦卒中的技術(shù)啟示。

因此，在對比文件1的基礎(chǔ)上結(jié)合對比文件2得到權(quán)利要求1請求保護(hù)的技術(shù)方案對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的，權(quán)利要求1不具有突出的實質(zhì)性特點和顯著的進(jìn)步，不符合專利法第22條第3款有關(guān)創(chuàng)造性的規(guī)定。

如果只從審查意見通知書記載的內(nèi)容來看，很難找到有力的論點，證明本申請的創(chuàng)造性。

但是在閱讀對比文件1過程中發(fā)現(xiàn)關(guān)于表面標(biāo)志物的表達(dá)情況記載如下：

此時，與申請人溝通時得知：2006年，國際細(xì)胞治療學(xué)會（ISCT）提出MSCs的最基本定義，即在塑料器皿培養(yǎng)條件下，呈貼壁生長；有一定的表面標(biāo)記物，表達(dá)CD105、CD73和CD90，不表達(dá)（表達(dá)量≤2%）CD45、CD34、CD14或CD11b、CD79α或CD19及HLA-DR表面標(biāo)記，檢索參考文獻(xiàn)^[3]發(fā)現(xiàn)：CD14還是區(qū)別間充質(zhì)干細(xì)胞與造血系細(xì)胞的標(biāo)志物。

而對比文件1中，三種MSC的CD14表達(dá)量均大于等于33%，均不符合間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)。

因此將對比文件1表面CD14的表達(dá)量作為答復(fù)要點，重新認(rèn)定申請文本與對比文件1的區(qū)別技術(shù)特征為：使用的細(xì)胞種類不同，本申請使用的是間充質(zhì)干細(xì)胞，而對比文件1使用的細(xì)胞中還包括造血系細(xì)胞。

根據(jù)申請文本的記載，修改了權(quán)利要求書，進(jìn)行了意見陳述，最終獲得了授權(quán)。

總結(jié)

僅瀏覽審查意見通知書往往難以找到一個恰當(dāng)且有效的答復(fù)思路。仔細(xì)地閱讀并深入分析原始文件。才能發(fā)現(xiàn)那些可能被忽視的關(guān)鍵點和突破口，從而有針對性地制定出切實可行的答復(fù)策略，提高獲得授權(quán)的可能性。

[1] Russo E, Lee JY, Nguyen H, et al. Energy Metabolism Analysis of Three Different Mesenchymal Stem Cell Populations of Umbilical Cord Under Normal and Pathologic Conditions. Stem Cell Rev Rep. 2020;16(3):585-595. doi:10.1007/s12015-020-09967-8

[2]蘇紅軍,相蕾.顱骨與骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療大鼠缺血性腦卒中療效對比觀察[J].山東醫(yī)藥,2020,60(08):24-28.

[3]張德雙,陳娟.人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的體外獲取、鑒定及標(biāo)記[J].華西醫(yī)學(xué),2015,30(11):2067-2070.

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從對比文件中，尋找答復(fù)創(chuàng)造性問題的突破口

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